高速逆流色谱制备西红花苷工艺及西红花酸不变

具体的操作是在试管中按必然的比例配好两相溶剂系统猛烈振荡使各溶剂充实夹杂静置一段时间当分派均衡后别离取出等体积的两相溶液置于另一试管中再向该试管中插手适量样品猛烈振荡试管使样品在两相平分配静置一段时间达分派均衡后两相溶液别离经测定记实每一组分的峰面积若某组分在上下两相溶液中的峰面积别离为则该组分在这种溶剂系统中的分派系数。研究发觉西红花酸能高糖血管内皮细胞的凋亡该感化可被剂所削弱【】。以树脂为吸附剂精制色素得率色价为精制结果优良树脂的利用周期长。吕晓玲【】等研究了吸附树脂法精制栀子素的工艺前提。栀子素是一种栀子的水提取或醇提取物是栀子的次要开辟产物次要成分是西红花苷、还有少量栀子苷绿原酸及黄酮等。针对我国的生物资本丰硕及多样性特点学界提出中药现代化的历程使一多量中药及天然产品获得了充实隔辟及操纵。典型的溶剂系统是氯仿甲醇强极性溶剂系统强极性溶剂系统的根基两相构成是正丁醇和水可按照需要在上下相中插手甲醇、乙酸乙酯等来调理溶剂系统的极也可在系统的上下相中插手适量的酸和碱调理值以增大极性。此中法以其高效、精确、快速的长处使用最为普遍。还有人提出用制冷剂作流动相的可能性因其保留值更高合用于极性系统。合用于分手弱极性的生物碱、黄酮、萜类、木脂素等化合物。张富芳等【】从工艺角度调查了中等或低极性树脂对西红花苷有较好的吸附能力在分歧浓度乙醇水溶液中树脂对西红花苷及栀子苷有分歧的选择吸附及洗脱机能。国内对栀子素用于糖果、饼干、蛋卷、桔汁、汽水、冷饮、果酒进行食用试验结果较好。张德权【】等比力了种树脂对栀子成分吸附行为成果表白大孔树脂选择性吸附与解吸率均可达以上可获得以下的栀子素。文献【】采用了硅胶柱法乙酸乙酯甲醇为洗脱剂梯度洗脱取其馏分用薄层色谱以乙酸乙酯甲醇为展开剂分手最初辅以高效液相制备三步获得了西红花苷纯度达同时采用精细大孔树脂取代常规的粗粒径大孔树脂进行吸附层析将常压手艺升级到加压手艺用持续轮回层析方式代替保守的线性层析方式提高了柱效和层析效率共同柱精制能够间接获得西红花苷纯品。高速逆流色谱制备西红花苷工艺及西红花酸不变性研究文献综述文献综述研究布景栀子是茜草科栀子属动物是一种常绿灌木生于山野间顺应性强普遍分布于热带和带地域全世界约有我国有种。这种流动相在常温常压下是气体当样品从柱中流出流动相常压下变为气体不必再富集或蒸干溶剂收集从而避免了纯品的丧失。何书英等发觉西红花苷对氧化性低密度脂卵白致内皮细胞毁伤的感化【】。西红花苷水溶液呈弱酸性或中性为通明鲜艳最大接收波长其色调几乎不受值的影响耐光、耐热性在中性或碱性时佳酸性时差耐金属离子性好除铁以外遇铁变黑文献综述天然的西红花苷具有于栀子果实、香椿属动物的花、毛蕊花属动物的花、西红花等动物中。我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱使用的国度【溶剂选择溶剂系统的选择对于十分环节。

在色素方面也具有相当高的分手精度。按照上述几个前提在天然产品分手纯化中文献综述常用的溶剂系统次要有以下三大类弱极性溶剂系统弱极性溶剂系统的根基两相由正己烷和水构成可按照需要在上下相中插手分歧体积比的甲醇、乙酸乙酯等来调理溶剂系统的极性达到较好的分手。因为我国西红花资本欠缺而栀子资本十分丰硕江西四川、广西等地均有合适要求的栀子种植。谢凤霞等【】采用大孔树脂柱层析分手天然产品栀子素为对象会商了其吸附特征吸附流速采用梯度洗脱并以速度洗脱获得精制栀子素色价达。比来西红花苷已被证明对小鼠大脑中动脉堵塞惹起的神经元的毁伤有必然的感化【】和具有通过的磷酸化血管内皮发展因子血管生成感化…】。因而以栀子为原料深度开辟西红花苷、西红花酸类化合物的药用价值具有主要的社会意义和经济价值。栀子素的色价是指色素样品浓度为、吸光距离为西红花苷和西红花酸微胶囊的制备及不变性研究在处的吸光度色价越高栀子素红花苷含量越高。我国栀子资本次要分布于江浙、安徽、江西、等南方各省。栀子中的化学成分复杂包罗环烯醚萜苷类、三萜类、无机酸类、黄酮类等【】。西红花苷平安性高对小白鼠进行急性毒性试验体重剂量口服也无灭亡例用添加本色素的饲料进行亚慢性毒性试验成果亦无任何非常这个剂量如按人体换算相当于每人每天摄取。西红花苷成分西红花苷是一种萜类化合物布局如图属于类胡萝卜素系红花酸的二龙胆糖酯为红棕色针状晶体熔点。专利【】报导了用高速逆流色谱分手西红花苷它采用乙酸乙酯水系统作为上下相溶剂分手获得了高纯度的西红花苷。西红花酸和西红花苷一具有类似的体内抗氧化活性其次要活性部位可能是肝脏和肾脏【。

受限于大孔树脂方式本身局限性很罕见到高纯度的单体成分隔辟栀子单体成分既能使栀子产物附加值升级也是中药现代化的主要课题因此具有主要意义。栀子在我国的入药汗青长久但不断以来都只是以一种药剂或辅助成分被使用。因而在凡是利用浓度下能够认为是完全无害的【】。值比率是指色素样品溶液在处的吸光度与处的吸光度的比值此中处的吸光度代表栀子苷含量处的吸光度代表西红花苷含量值越小申明色素样品中的栀子苷含量越低栀子苷是惹起栀子素绿变的次要要素它在卵白酶或葡萄糖苷酶的感化下易与伯氨基化合物发生反映生成栀子蓝色素。西红花酸能降低冠脉结扎大鼠点位移和心肌梗死面积百分率减轻心肌组织病理改变【】。故本文也采用作者这一工艺流程对栀子素进行纯化制各西红花苷粗品。目前分派系数的测定常采用薄层色谱法、毛细管电泳法、法、生物活性分派比率法及阐发型法。此外用正己烷乙醇可从微藻平分离出纯度为的叶黄素【其纯度为从而成立了高纯度丹酚酸化学对照品的制备分手方式不单合用于极性化合物同样合用于非极性化合物既可用于天然产品粗提物的去杂也可用于最初产品的精制以至可一步获得纯品。

此项手艺已被使用于生化、生物工程、医药、榆林学院官网天然产品化学、无机合成、阐发、食物、地质、材料等范畴。虽然我国栀子素曾经获得普遍使用而且构成了行业尺度可是这种初级提取物工艺粗犷且没有固定的出产方式产质量量也不克不及获得切确的节制因而进一步开辟栀子素的高附加值产物是必然的趋向。文献给出了溶剂的选择如图所示。目前溶剂系统的选择一般按照尝试堆集的经验还没有一套完整的理论根据。分手实例目前曾经有大量关于用于天然产品纯化方面的文献。它被普遍使用于食物着色或香料范畴而且构成了行业尺度。栀子是一味常用中药亦属卫生部公布的首批药食两用资。

等对西红花苷的树脂吸附机理进行研究文献考查了四种系列树脂非极性强极性树脂对栀子西红花总苷的吸附成果表白树脂为最佳【】更切确地研究了大孔吸附树脂对西红花苷的吸附的热力学性质研究成果表白该吸附为自觉、吸热和熵增的物理吸附过程为树脂分手纯化供给了理论根据。此中栀子中各类成分也被分级操纵及开辟特别是此中的环烯醚萜及类胡萝卜素成分。祝顺琴等【】综述了在分手生物碱、黄酮、醌类、酚类及脂肪酸类物质特别是在天然色素及抗生素方面的使用实例。以栀子为原料用水提取及醇提取的方式再辅以大孔树脂的分手工艺获得栀文献综述子素可以或许获得值较高的栀子素可是纯真用树脂法很罕见到高纯度的西红花苷产物必需辅以其它纯化手段。高速逆流色谱制备西红花苷工艺及西红花酸不变性研究文献综述文献综述研究布景栀子是茜草科栀子属动物是一种常绿灌木生于山野间顺应性强普遍分布于热带和带地域全世界约有我国有种。西红花是一种抱负的提取对象但因为它常高贵的香料和珍贵的药材开辟西红花时只操纵花的柱头产量极低因此不适合作为提取对象。虽然栀子红花苷含量低于西红花但栀子产量高价钱低廉可满足规模化出产对资本的需求是一种极具开辟使用前景的天然产品原料。溶剂系统选择插手的辅助溶剂。另一些研究表白口服西红花酸氧化应激惹起的视网膜损害可能是通过半胱天冬酶路子【西红花苷和西红花酸微胶囊的制各及不变性研究西红花苷具有优良心理活性使得其提取纯化研究成为需要。用高速逆流色谱方式分手几种高活性的天然产品如银杏内酯【、丹参酮、葛根素、莨菪碱、小檗碱等的分手方式曾经研究得比力成熟色素方面则有红曲霉素、甜菜红碱色素等获得分手。虾青素是类胡萝素中抗氧化活性最强的物质采用正己烷乙酸乙酯甲醇溶剂系统经一步纯化从粗品平分离出纯度大于文献综述虾青素。文献以无机溶剂浸提法粗制栀子素然后采用凝胶层析法和大孔树脂吸附法精制栀子色素确定了精制工艺前提获得的栀子素色价高达】。栀子色素是纯天然色素、无毒具有必然的养分价值和保健感化界市场上特别美、日等国颇受接待。手艺是一种较新型的液液分派手艺它不消任何固体载体或支持体由美国国立卫生院博士于岁首年月创可在短时间内实现高效分手和制备并可达到几千个理论塔板数是成立在一种特殊的流体动力学均衡根本上操纵螺旋管的高速式活动发生的不合错误称离心力场实现两相溶剂系统的充实保留和无效夹杂及分派从而实现物质在两相溶剂中高效分手系统中无固相载体避免了常规层析色谱中被分手样品与固相支撑物概况发生化学反映而发生不成逆吸附或变性以致方针产品丧失。有人提出用超临界二氧化碳作流动相由于其具有高扩散性、低粘度流体特征以及敌对等其他无机溶剂不成对比的劣势。图西红花苷布局式以栀子为原料颠末提取获得的栀子素的次要成分便是西红花苷。凡是来讲两相溶剂系统应满足以下要求方针分手物在溶剂系统中该当是可溶的、不变的溶剂系统不会导致样品的分化或变性溶剂系统不克不及影响样品的检测样品中各组分在溶剂系统中有合适的分派比一般认为分派系数在的范畴内是较为恰当的而且各组分的分派系数值要有较着的差别分手因子最好大于或等于固定相的保留率不得低于溶剂系统的分层时间不得少于上下两相的体积比尽量为采用挥发性溶剂以便利后续处置避免利用毒性大的溶剂。

适合于极性很强的生物碱类化合物的分手。当值比率小于可避免绿变的发生因而高色价低值成为栀子素主要质量尺度。我国栀子资本丰硕因而我国的西红花苷多是从栀子中提取的产品。我国栀子资本次要分布于江浙、安徽、江西、等南方各省。订鲜花，近年来溶剂系统的选择范畴越来越普遍只需满足上述根基前提可按照样品的化学性质选择溶剂。目前西红花苷次要从天然产品中提取分手获得。天然药物醇一醋酸一求水溶性翱强辍一歪丁群甲醇一水正丁醇一乙酸乙醋一水缓冲渡》乙酸乙醋一水缓冲液》氯谚一印酵一水中等辍性《氯仿洛解弱极耋《正己烷消融乙酸乙酯一甲醇一承歪己婉一乙酸一零酵一水乙睛歪己疑一泽醇一水歪已靛一乙酸一零醇一水石瀣醚一乙酸乙隆一甲醇一水图常见溶剂选择图分歧的溶剂系统具有分歧的上下相之比其粘度、极性和密度等性质也相差西红花苷和西红花酸微胶囊的制备及不变性研究甚近因而对不异的成分具有分歧的消融和分派能力形成分派系数的差别对分手结果发生分歧的影响。栀子是一味常用中药亦属卫生部公布的首批药食两用资本明朝李时珍的《本草纲目》中已有细致记录栀子具有护肝、利胆、降压、止血、消肿、清热、利寒等感化。西红花苷具有很高的药用价值西红花苷很早就被发觉具有抗炎【、抗癌活性【】和具有保肝感化【。典型的溶剂系统是正己烷乙酸乙酯甲醇中等极性溶剂系统中等极性溶剂系统的根基两相由氯仿和水构成可按照需要在上下相中插手分歧体积比的甲醇、乙酸乙酯等来调理溶剂系统的极性适合于黄酮类、蒽酮类、香豆素、以及一些极性较大的木脂素和萜类的分手。文献【】采用中等极性的树脂对栀子提取液进行吸附后用纯水先洗脱树脂吸附的绿原酸等成分再以乙醇洗脱栀子苷成分最初以乙醇洗脱栀子素和残剩的栀子苷获得了西红花苷粗品达到了分手精制的目标。陈阳发觉西红花酸和西红花苷具有类似的体内抗氧化活性其次要活性部位可能是肝脏和肾脏。我国国标对食物中栀子素利用含量如下果汁饮料类、碳酸饮料、配制酒、糕点上彩装、糕点、雪糕、冰棍、果冻、蜜饯、膨化食物、面饼、糖果、栗子罐头、冰激凌烧麦皮。按照在螺旋管中进行活动的溶剂流体力学特征的分歧将溶剂系统分为疏水性、中等疏水性和亲水性系统。易溶于热水微溶于无水乙醇、及其他无机溶剂不溶于油脂。

跟着新工艺的开辟及现代阐发手段的改良分手后可与各式检测器进行耦合以间接进行定性或定量阐发如紫外检测器、傅立叶变换红外检测器、质谱、蒸发激光散射检测器等。对于一些布局复杂的化合物则因其分手量较大能够经如质谱、核磁共振谱等给出布局消息而予以判定布局从而充实阐扬快速、高效、活络度高的长处更好地用于中药的阐发判定。分手方式简介高速逆流色谱是一种快速高效持续的液液分派色谱分手手艺在中药生化食物天然产品化学及阐发等范畴有着普遍的使用。但本人尝试发觉正丁醇水系统对西红花苷有更好的分派机能因而可深切研究西红花苷的高速逆流色谱分手系统。一般认为乙醇浓度对栀子红花苷和栀子苷的提取效率影响较大极高浓度和极低浓度乙醇都晦气于这两类成分的提取而中等浓度的乙醇能够较好地将两类成分提取出来【】。一般环境下按照要分手的方针化合物的性质及参考文献初步确定溶剂系统然后调全体系比例但若是选择溶剂系统不成功就需要进行大量繁琐的工作。与其它色谱手艺比力具有以下长处没有固相载体避免了待分手样品与固相载体概况发生化学反映而变性及不成逆吸附样品不需要严酷的预处置在阐发及分手高粘度和易形成固定相吸附的样品方面具有较着劣势分手过程可逆流操作分手塔板数高分手效率很高可间接从成分复杂的粗制物猜中制备高纯度的化合物色谱柱是空管无布局体全数是无效空间样品负载能力强制备量大重现性好合用范畴很普遍既可分手生物碱、黄酮等无机小也能够分手多肽、卵白质、多糖等大化合物有多种规模与型号既可实现阐发也可进行规模化制备仪器操作简单改换流动相简洁设备性价比高有益于推广。

西红花酸的不变性不变性阐发西红花酸是西红花苷的苷元其布局如图所示西红花酸布局式西红花酸具有很好的生物活性据文献报道其活性以至跨越了西红花苷。这种抗氧化活性次要是由多碳共轭二烯布局带来的它使得常见的天然产品表示出极强的心理活性如番茄红素、按照日本栀子素可用于糕点、果冻、糖果、面条、冷饮等顶用量尚可用于腊肠肠衣、人造奶油、起酥油、食物商标用色素配料等方面。榆林园林招聘钱之玉等指出西红花苷具有显著的调血脂感化【】。上世编年代后跟着逆流色谱仪的改良和完美的阐发能力也西红花苷和西红花酸微胶囊的制备及不变性研究大大提高其使用范畴已从制备量级扩展到微量阐发。因为高速逆流色谱具有操作简单、分手的组分纯度高且分手量大的特点被普遍使用于中药材化学成分的分手纯化上中药虎杖银杏大黄茶叶红景天前胡等无效成分的分手纯化】采用正己烷一乙酸乙酯乙醇一水为溶剂系统操纵从丹参粗提物中获得纯度大于的丹参酚酸。